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IVD生化(CKMB)方案体系-兼中生物

2019.07.21-1   文章来源:兼中生物,技术部18357475972,903250467@qq.com

CKMB-R1体系(1L)

配制工艺:

水(800g/L)

1. Imidazole 咪唑(3-10g/L):8.51g

2. 冰乙酸 (1.0-5.0g/L):3.833g

3. 乙酸镁 Mg(AC)2.4H2O (0.1-3g/L):2.6806g

4. 二磷酸腺苷 (0.1-2g/L):1.2533g

5. 一磷酸腺苷 (0.50-5g/L):2.445g

6. 二腺苷五磷酸 (适量):0.0117g

7. 氧化型辅酶Ⅰ(NAD+) (0.05-2g/L):1.6585g

8. N-乙酰-L半胱氨酸/NAC(1.0-6.0g/L):4.08g

9. 已糖激酶/HK (适量):4KU

10. NaN3 (0.1-1.0g/L):0.9g

11. CK-M单克隆抗体 (适量):1.667ml

12. CKO (适量):50g。请以重量单位。若有结晶析出,取出充分摇匀溶解后使用。

PH:5.0-8.0(6.72)

操作流程:

1.1 在合适的专用容器中,加入批生产量的80%的水。(800mL)

1.2 一边搅拌,一边缓慢加入下列试剂:Imidazole 咪唑 ,搅拌直至完全溶解,加入冰乙酸 。

1.3 分别依次加入CKO,NaN3,乙酸镁 Mg(AC)2.4H2O ,二磷酸腺苷,一磷酸腺苷 ,二腺苷五磷酸,氧化型辅酶Ⅰ(NAD+),N-乙酰-L半胱氨酸/NAC。(待前一种试剂充分溶解后,再加入后一种试剂)

1.4 再一次用冰乙酸或NaOH(4mol/L)调节PH至6.72

1.5 一边搅拌,一边缓慢加入已糖激酶/HK,搅拌均匀。

1.6 一边搅拌,一边缓慢加入CK-M单克隆抗体,搅拌均匀。

1.7 加去离子水至生产量,2-8℃保存,待检测。

CKMB-R2体系(1L)

配制工艺:

去离子水 (800g/L)

1. 3-(环己胺)-2-羟基-1-丙磺酸缓冲液(Capso) (1.0-10g/L):4.746g

2. 磷酸肌酸/CP (20-60g/L):49.08g

3. NaN3 (0.1-1.0g/L) :0.9g

4. D-(+)-Glucose D-(+)-葡萄糖 ( 1.0-10g/L):6.6192g

5. 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶/G6PDH (10-40KU):25KU

6. CKT:50g。请以重量单位。若有结晶析出,取出充分摇匀溶解后使用。

最终补足去离子水至1L

PH:5.0-10.0(9.1)

操作流程:

1.1 在合适的专用容器中,加入批生产量的80%的水(800mL)。

1.2 一边搅拌一边缓慢加入下列试剂:3-(环己胺)-2-羟基-1-丙磺酸缓冲液(Capso),NaN3,搅拌至完全溶解。

1.3 用NaOH(4mol/L)调节PH约9.6。

1.4 一边搅拌,一边缓慢加入D-(+)-Glucose D-(+)-葡萄糖,CKT,磷酸肌酸/CP,搅拌均匀。(待前一种试剂充分溶解后,再加入后一种试剂)

1.5 测定PH,再次调节PH至9.10(25℃)。

1.6 加入葡萄糖-6-磷酸脱氢酶/G6PDH ,搅拌溶解。

1.7 补足去离子至生产量,2-8℃存储,待检。

兼中生物 技术部18357475972,903250467@qq.com


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