标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果，甚至是关系到实验的成败。有不少科研朋友咨询曲线的问题。下面小编将影响ELISA试剂盒曲线问题的原因做了总结：
一 OD值不正常的可能原因是：
1、试剂盒未回温，试剂盒回温到25℃；
2、温度控制不好，控制正确温度；
3、孵育时间不准确，控制孵育时间；
4、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加，洗涤4-5次，每孔250ul，然后拍干；
5、阳光直射，对着风直接吹，应避风；
6、酶标仪的波长错误，酶标仪的波长450nm；
7、抗体的稀释错误，正确的稀释抗体；
8、水质问题，用娃哈哈矿泉水代替。
二 白板的可能原因是：
1、洗涤液配制错误，正确的配制洗涤液；
2、少加液体（错加液体），正确的步骤加液体。
三 无梯度可能原因是：
1、标准品也污染，换标准品点板；
2、OD值不正常，控制温度时间在做一次；
3、人为点板，不要点板。
四 线性不好可能原因是：
1、操作上带来的误差
2、标准品加的不准确
3、反应温度和时间没有控制好