配方一
底物显色A液:醋酸钠13.6g,柠檬酸1.6g,30%双氧水0.3ml,蒸馏水加至500ml。
底物显色B液:乙二胺四乙酸二钠0.2g,柠檬酸0.95g,甘油 50ml,0.15g TMB蒸馏水加至500ml。如果是普通的TMB,而非盐酸盐,要先用DMSO溶解后再加入水中。本产品可以用水溶解。
配方二
TMB母液:用DMSO将TMB配成1%浓度,4°C保存。
TMB工作液:在pH5.0柠檬酸缓冲液9.9ml中加入0.1ml 1%TMB液。
PH5.0柠檬酸缓冲液配方:0.1mol/L柠檬酸24.3ml,0.2mol/L Na2HPO4 25.7ml,H2O 50ml
配方三
A液:先配1mol柠檬酸。柠檬酸 2.1g ,乙二胺四乙酸二钠 0.372g,水800ml,室温搅拌,待溶解后调PH3.0,再配:三水合乙酸钠 13.6g,30% H2O2 0.27ml,1mol柠檬酸 7.5ml,水定容 500ml。
B液:量取丙三醇 100ml, 水定容至953ml,量取10mg/mlTMB 47ml。
配方四
底物显色A液:醋酸钠13.6g ,柠檬酸1.6g,30%双氧水0.3ml,蒸馏水加至500ml。
底物显色B液:乙二胺四乙酸二钠0.2g,柠檬酸0.95g,甘油 50ml,取0.15g溶于3mlDMSO中,蒸馏水加至500ml。
配方五
底物缓冲液 pH5.0的磷酸-柠檬酸缓冲液,配制方法为:
0.1mol/L柠檬酸C6H8O7•H2O),即称取柠檬酸19.2g,加水至1000mL,为甲液;
0.2mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4),即称取磷酸氢二钠71.7g,加水至1000mL,为乙液;
取甲液24.3mL,乙液25.7mL,加水至100mL,即可
底物溶液:取50μL TMB(10mg TMB溶于1mL DMSO中)溶液+10mL底物缓冲液+10μL30%过氧化氢,混匀。